Η υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης (HPLC) είναι μια ισχυρή αναλυτική τεχνική που χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό, την αναγνώριση και τον ποσοτικό προσδιορισμό των συστατικών ενός μείγματος δείγματος με βάση τις χημικές τους ιδιότητες. Χρησιμοποιείται ευρέως σε πολλούς τομείς, συμπεριλαμβανομένων των φαρμακευτικών προϊόντων, της βιοτεχνολογίας, της περιβαλλοντικής ανάλυσης και της βιομηχανίας τροφίμων.
Στην HPLC, το δείγμα εγχέεται σε μια στήλη γεμάτη με υλικό στατικής φάσης και μια κινητή φάση (ή υγρό έκλουσης) ρέει μέσω της στήλης για να μεταφέρει τα συστατικά του δείγματος μέσω του συστήματος. Η στατική φάση μπορεί να αποτελείται από διάφορα υλικά όπως σιλικαζέλ, αλουμίνα ή ρητίνες με βάση πολυμερή και η κινητή φάση μπορεί να είναι ένας μόνος διαλύτης ή ένα μείγμα διαλυτών.
Η επιλογή της κινητής φάσης και της στατικής φάσης είναι κρίσιμη για την επίτευξη του επιθυμητού διαχωρισμού. Η κινητή φάση συνήθως αποτελείται από νερό, έναν οργανικό διαλύτη όπως η μεθανόλη ή το ακετονιτρίλιο, ή ένα μείγμα αυτών των διαλυτών. Η επιλογή του διαλύτη εξαρτάται από τη φύση του δείγματος και τη στατική φάση.
Το εξαιρετικά καθαρό νερό είναι ένας ευρέως χρησιμοποιούμενος διαλύτης στην HPLC επειδή δεν περιέχει ακαθαρσίες που θα μπορούσαν να επηρεάσουν τη διαδικασία διαχωρισμού. Ακαθαρσίες όπως άλατα, ιόντα και οργανικές ενώσεις μπορεί να οδηγήσουν σε διεύρυνση της κορυφής, κακή ανάλυση ή ακόμα και απώλεια διαχωρισμού. Επομένως, είναι απαραίτητο να χρησιμοποιείται εξαιρετικά καθαρό νερό για την προετοιμασία της κινητής φάσης και την αραίωση των δειγμάτων.
Ο όρος "υπερκαθαρό νερό" αναφέρεται σε νερό που έχει υποστεί επεξεργασία για την αφαίρεση όλων των ακαθαρσιών στον υψηλότερο δυνατό βαθμό. Αυτό το επίπεδο καθαρότητας επιτυγχάνεται με συνδυασμό φυσικών και χημικών διεργασιών, συμπεριλαμβανομένης της αντίστροφης όσμωσης, του απιονισμού και της απόσταξης.
Η αντίστροφη όσμωση είναι μια διαδικασία που χρησιμοποιεί πίεση για να πιέσει το νερό μέσα από μια ημιπερατή μεμβράνη, αφαιρώντας τους ρύπους και τις ακαθαρσίες. Ο απιονισμός είναι μια διαδικασία που χρησιμοποιεί ρητίνες ανταλλαγής ιόντων για την απομάκρυνση ιόντων και μετάλλων από το νερό και η απόσταξη περιλαμβάνει βρασμό του νερού και συλλογή του προκύπτοντος ατμού, ο οποίος συμπυκνώνεται για να παραχθεί καθαρό νερό.
Αφού καθαριστεί το νερό, είναι απαραίτητο να διατηρήσετε την καθαρότητά του αποθηκεύοντάς το σε καθαρά, αποστειρωμένα δοχεία και φιλτράροντάς το αμέσως πριν από τη χρήση για να αφαιρέσετε τυχόν εναπομείναντα σωματίδια, βακτήρια ή άλλους μικροοργανισμούς.
Συνοπτικά, το εξαιρετικά καθαρό νερό είναι απαραίτητο στην HPLC, καθώς διασφαλίζει ότι η κινητή φάση και τα δείγματα είναι απαλλαγμένα από ακαθαρσίες που θα μπορούσαν να επηρεάσουν τη διαδικασία διαχωρισμού. Παράγεται με συνδυασμό φυσικών και χημικών διεργασιών και αποθηκεύεται και χειρίζεται προσεκτικά για να διατηρεί την καθαρότητά του.
Comments